Este é o passo que realmente compromete a glicose com a degradação, já que a glicose-6-P pode ser desviada para o armazenamento (como glicogênio) e o segundo passo é reversível.

Sendo a glicólise uma via produtora de energia, a necessidade desta (reconhecida pelos altos níveis de ADP e AMP, resultantes do consumo de ATP) deve ser um regulador positivo, ocorrendo o inverso no excesso de ATP.